כיצד מודדים את פעילות האנזים במעבדה?

2024 מְחַבֵּר: Michael Samuels | [email protected]. שונה לאחרונה: 2024-01-18 09:28

Assay אנזים

1. אֶנזִים מבחני הם מַעבָּדָה שיטות עבור מדידת פעילות אנזימטית .
2. הכמות או הריכוז של אֶנזִים יכול להתבטא בכמויות טוחנות, כמו בכל כימיקל אחר, או במונחים של פעילות ב אֶנזִים יחידות.
3. פעילות אנזים = שומות של מצע המרות ליחידת זמן = קצב × נפח תגובה.

בהקשר זה, כיצד משתמשים בספקטרופוטומטר למדידת פעילות האנזים?

במהלך א בדיקה ספקטרופוטומטרית , המפעיל עוקב אחר המסלול של an אֶנזִים תגובה של מדידה השינויים בעוצמת האור הנספגים או המפוזרים בתמיסת התגובה. לפעמים, צריך להיות יותר מאורך גל אחד בשימוש לייצר אותות חזקים ל לחשב ה פעילות האנזים.

בנוסף, כיצד אתה מודד את פעילות הלקטאז? מדידה אֶנזִים פעילות הוסף 10 μL של לקטאז לחלץ לצינור התגובה B, לערבב על ידי מערבולת ולאפשר לתגובה להמשיך במשך דקה אחת בטמפרטורת החדר. לאחר שחלפה דקה אחת, הוסף 500 μL של 1 M נתרן קרבונט לשתי הצינורות כדי לעכב את לקטאז האנזים על ידי הגדלת ה- pH, ובכך מסיים את התגובה.

בהתחשב בכך, מדוע אנו מודדים את פעילות האנזים?

פעילות אנזים הוא מידה של כמה אֶנזִים קיים בתגובה. יש שתי דרכים לעשות זאת למדוד את פעילות האנזים : ניטור היעלמות המצע או מראה המוצר. אֶנזִים מבחני יכולים גם לחשוף מידע על המצעים והמעכבים שעלולים להשפיע על אֶנזִים.

מהם הגורמים המשפיעים על פעילות האנזים?

מספר גורמים משפיעים על קצב התקדמות התגובות האנזימטיות - טֶמפֶּרָטוּרָה , pH, ריכוז האנזים , ריכוז המצע , ונוכחות של מעכבים או מפעילים כלשהם.