מה מטרת הנוגדן העיקרי בכתם מערבי?
מה מטרת הנוגדן העיקרי בכתם מערבי?

וִידֵאוֹ: מה מטרת הנוגדן העיקרי בכתם מערבי?

וִידֵאוֹ: מה מטרת הנוגדן העיקרי בכתם מערבי?
וִידֵאוֹ: Probe the Western blot for your target proteins using primary and secondary antibodies 2024, יולי
Anonim

בשיטת הגילוי הישיר, מצמידים אנזים או פלואורופור נוגדן ראשוני משמש לאיתור האנטיגן המעניין את כֶּתֶם . בשיטת הגילוי העקיף, ללא תווית נוגדן ראשוני משמש לראשונה לקשר לאנטיגן.

יתר על כן, מהו הנוגדן העיקרי בכתם המערבי?

ה נוגדן ראשוני מזהה ומחייב את האפיטופ או את רצף חומצות האמינו הספציפי של החלבון המעניין. מִשׁנִי נוגדנים משמש ל סופג מערבי בדרך כלל מצומדות עם אנזים; האנזימים הנפוצים ביותר הם פרוקסידאז סוס צנון (HRP) ופוספטאז אלקליין (AP).

בנוסף, מה הנוגדן העיקרי עושה? נוגדנים ראשוניים הם אימונוגלובולינים הנקשרים לאנטיגן ספציפי ( חֶלְבּוֹן , פפטיד, מולקולה קטנה וכו ') בעלי עניין והם בדרך כלל לא מצומדים. נוגדן ראשוני טוב מזהה ונקשר בעל זיקה וספציפיות גבוהה לטהר, לזהות ולמדוד את האנטיגן.

כתוצאה מכך, מה מטרת כתם מערבי?

א כתם מערבי היא שיטת מעבדה המשמשת לאיתור מולקולות חלבון ספציפיות מתערובת של חלבונים. לאחר מכן, מולקולות החלבון מופרדות בהתאם למידותיהן בשיטה הנקראת ג'ל אלקטרופורזה. לאחר ההפרדה, החלבונים מועברים מהג'ל אל א סופג קְרוּם.

כיצד משתמשים בנוגדנים בסופג המערבי?

נוגדנים הם בשימוש לאתר חלבוני מטרה על כתם מערבי (immunoblot). ה נוגדנים מצומדות עם תוויות או אנזימים ניאון או רדיואקטיביים שנותנים תגובה לאחר מכן עם מגיב מיושם, מה שמוביל לצביעה או פליטת אור, המאפשר זיהוי.

מוּמלָץ: